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詳細介紹
PsmCas13b 酶產品簡介:
規律成簇間隔短回文重復(CRISPR)在基因編輯過程中發揮了強大的生命力。其中,科學家掌握了對一種蛋白-Cas9的操作技術,并先后利用該技術對多種細胞的DNA進行了編輯。這種技術被稱為CRISPR/Cas9基因編輯系統,迅速成為生命科學熱門的技術。不像其他基因編輯手段,它使用起來廉價、迅速且簡單,并因此席卷全球實驗室。最近科學家發現CRISPR在核酸檢測方面同樣表現出了強大的生命力。本品為PsmCas13b 酶,產品經過純化以確保其質量。
基于CRISPR Cas13的核酸檢測原理:
CRISPR-Cas系統通過RNA引導的內切酶構成細菌的適應性免疫系統。該系統經過重新設計,創建了一個示例性的基因組編輯工具,用于基于RNA的治療開發。PsmCas13b(Prevotella sp. MA2016-Cas13b)是一種CRISPR-Cas效應器,屬于第2類VI-B亞型,已被證明能有效靶向和沉默不同的哺乳動物ssRNA病毒。Cas13b通過短和長的直接重復處理自己的CRISPR陣列,切割靶RNA,并表現出附帶的RNase活性(圖1)。
產品描述:
重組全長Prevotella sp. MA2016-Cas13b(PsmCasl3b)在大腸桿菌中表達。重組蛋白儲存在50mM Tris pH7.5、600mM NaCl、2mM DTT、5%甘油中。
儲存和穩定性:
在-80℃下儲存產品。為了達到最佳儲存效果,離心后將試劑分裝凍存,并在推薦的溫度下儲存。為了獲得最佳性能,避免重復凍融。
反應緩沖液成分:
200 mM HEPES PH 7.0、500 mM kCI、50 mM MgCl2、I mg/mL BSA。
報告底物:
合成的RNA寡核苷酸,寡核苷酸的兩端分別標記熒光基團和淬滅基團。
檢測方案:
Cas13b的RNA反式切割活性在基于CRISPR的熒光報告分析中檢測到。RNA引導的RNA與Cas13b結合激活酶,誘導靶RNA切割以及側支RNase活性。后者會導致在切割時發出光信號的報告底物降解。
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