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詳細介紹
與傳統的MTT 法相比CCK-8細胞增殖毒性檢測試劑盒具有明顯的優勢:
1.MTT 法生成的甲臜不是水溶性的,需要使用DMSO 等有機溶劑溶解;而CCK-8(CCK-8細胞增殖毒性檢測試劑盒) 產生的甲臜是水溶性的,省去了溶解步驟,因此減少了該操作步驟帶來的實驗誤差。
2.由于CCK-8 產生的甲臜是水溶性的,無需吸掉培養基后,再用DMSO 等有機溶劑溶解,非常適合用于懸浮細胞的活性測定。
3.與MTT 方法相比,CCK-8 法線性范圍更寬,靈敏度更高。
4.CCK-8 法對細胞無毒性,可以多次測定,選取最佳測定時間。
5.CCK-8 法無需配制,即開即用。
6.CCK-8 法適合大規模、高通量的樣品檢測。
使用方法:
1.在96 孔板中配制100 μL 的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養24 小時(在37℃,5% CO2的條件下)。
2.向培養板加入10 μL 的待測藥物進行處理。
3.根據實驗需要,將培養板在培養箱孵育一段時間 (例如:6, 12,24 或48 小時)。
注:如果不進行藥物處理而直接測定細胞的活性,則不需要2-3 步驟,直接從第4 步操作。
4.向每孔加入10 μL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響O.D 值的讀數)。
5.將培養板在培養箱內孵育2-4 小時。
6.用酶標儀測定在450 nm 處的吸光度。
7.如果暫時不測定OD 值,可 以向每孔中加入10 μL 1% SDS(w/v) 溶液或者 0.1 M HCl 溶液,并蓋上培養板蓋子,在室溫條件下避光保存。24 小時內吸光度不會發生變化。
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